愈傷組織的成功誘導與品種的基因型有關(guān)?搖Lloyd等(1988)曾研究Roseprsica與xanthina,hybrida,Clarissa,Rcabrosa的愈傷發(fā)生能力,發(fā)現只有Rosepersica與xanthina在MS基本培養基上,添加低濃度的BAP和NAA時(shí),節間能產(chǎn)生愈傷,愈傷組織脆弱,呈淡黃綠色。Kunitake等(1993)研究了RoserugosaThunb,Rosemultiflora,Roseallbacv,SemiplenaRosehybridacv,DuplesRoseharisonii,Rosespinosissi的未成熟種子的愈傷發(fā)生能力,發(fā)現只有RoserugosaThurb能產(chǎn)生愈傷組織,品種Rontl和Soraya比品種Baccara和Mercedes更易產(chǎn)生愈傷(Kintzios等,1999)。
外植體類(lèi)型?搖Aren等(1993)詳細地調查了RosehybridacvMeirutral不同外植體的愈傷誘導率,發(fā)現不同外植體愈傷產(chǎn)生的能力不同,葉為90%,根為70%,節間為55%,花藥為19%。
激素激素也是影響愈傷生成的重要因素,Rout等(1991)以L(fǎng)andora為材料,在添加BA和NAA,2,4-D的MS的培養基上,外植體在接種的7~12d后,在近軸面的葉柄和中脈處產(chǎn)生愈傷,愈傷組織誘導頻率高達92%。在接種后15~20d,外植體莖切端處產(chǎn)生愈傷,誘導率為76%。生長(cháng)素種類(lèi)和濃度對愈傷產(chǎn)生能力的影響同樣很大。早期實(shí)驗多采用NAA結合BAP或BA等,近年來(lái)多采用2,4—D,并證明2,4—D是誘導愈傷的必要因素(Kintzios等,1999;Rout等,1996;vanderSalm等,1996;Vises—suwan等,1997)。進(jìn)一步研究發(fā)現2,4-D對愈傷的誘導效果依賴(lài)于月季的基因型,如2,4—D濃度從113umol/L增加到181umol/L降低了Rosehybrida栽培種“Care-freeBeauty”的愈傷誘導頻率,但該濃度則對另一個(gè)品種“GrandGala”無(wú)影響。對于“RedSunblaze”而言,當濃度從113umol/L增加到452umol/L,則表現出愈傷的誘導率提高了,隨后當2,4—D再增加,則顯著(zhù)地降低愈傷的誘導頻率。愈傷組織在誘導愈傷組織的培養基上能得到很好繼代培養(subculture、Li等,2002)。VanderSalm等(1996)證明2,4—D對誘導Rosepersica與xanthina和Moneyway產(chǎn)生愈傷是非常必要的,進(jìn)一步添加低濃度的BA有正效應,但如BA濃度過(guò)高,則產(chǎn)生抑制作用。與以上實(shí)驗結果不同,Kintzios等(1999)則發(fā)現2,4—D對愈傷誘導有負影響作用,可能因為采用的外植體是成熟的葉片。
合子胚的發(fā)育時(shí)期對愈傷的形成能力也有影響?搖如處于心形胚的合子胚,其愈傷誘導率只有2%,子葉胚時(shí)的合子胚愈傷誘導率達到85%。
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